ic卡水表剩余水量图片:怎样从酵母中提取蔗糖酶?

采用甲苯自溶法、冻融法、SDS抽提法3种方法从酵母中提取蔗糖酶,经质量分数50%的乙醇分级沉淀、Mono Q阴离子交换柱层析纯化后,制得高纯度的酵母蔗糖酶.比较了上述3种提取方法并对该酶的部分性质进行了研究.纯化的酶经等电聚焦测定,等电点为 5.6,SDS-PAGE鉴定其相对分子质量为60 kD.以蔗糖为底物测得酵母蔗糖酶的表观米氏常数Km为0.013 mol/L.结果显示3种提取方法各有优劣,冻融法和SDS抽提法的提取效率远高于传统的甲苯自溶法.其中SDS抽提法的效率最高,加之其操作简便,更适 合于酵母蔗糖酶大规模的制备提取.

〔1〕阎伯旭、高培基.内切葡聚糖苷水解酶的分离纯化和内源荧光性质.生物化学杂志,1997,13(5):580～585
〔2〕王建枝,何善述,等.绒毛β-1,4葡萄糖苷酶的研究.生物化学杂志,1990,6(2):102～106
〔3〕袁静明,张崇华,等.戊二醛交联根霉葡萄糖淀粉酶的研究.生物化学与生物物理学报,1990,22(3):289～292
〔4〕余瑞远,倪逸生,等.大鼠、小鼠胰蛋白酶的分离纯化及动力学性质.生物化学杂志,1993,9(6):659～663
〔5〕BAILEY M, PETER B, KAISA P. Interalbortory testing of methods for assay of xylanase activity. J Biotech,1992,23:257～270
〔6〕朱静,严自正.微生物产生的木聚糖酶的功能和应用,生物工程学报,1996,12(4):375～378
〔7〕苏拔贤.生物化学制备技术.北京:科学出版社,1986,1.30-36

〔1〕阎伯旭、高培基.内切葡聚糖苷水解酶的分离纯化和内源荧光性质.生物化学杂志,1997,13(5):580～585
〔2〕王建枝,何善述,等.绒毛β-1,4葡萄糖苷酶的研究.生物化学杂志,1990,6(2):102～106
〔3〕袁静明,张崇华,等.戊二醛交联根霉葡萄糖淀粉酶的研究.生物化学与生物物理学报,1990,22(3):289～292
〔4〕余瑞远,倪逸生,等.大鼠、小鼠胰蛋白酶的分离纯化及动力学性质.生物化学杂志,1993,9(6):659～663
〔5〕BAILEY M, PETER B, KAISA P. Interalbortory testing of methods for assay of xylanase activity. J Biotech,1992,23:257～270
〔6〕朱静,严自正.微生物产生的木聚糖酶的功能和应用,生物工程学报,1996,12(4):375～378
〔7〕苏拔贤.生物化学制备技术.北京:科学出版社,1986,1.30-36

1〕阎伯旭、高培基.内切葡聚糖苷水解酶的分离纯化和内源荧光性质.生物化学杂志,1997,13(5):580～585
〔2〕王建枝,何善述,等.绒毛β-1,4葡萄糖苷酶的研究.生物化学杂志,1990,6(2):102～106
〔3〕袁静明,张崇华,等.戊二醛交联根霉葡萄糖淀粉酶的研究.生物化学与生物物理学报,1990,22(3):289～292
〔4〕余瑞远,倪逸生,等.大鼠、小鼠胰蛋白酶的分离纯化及动力学性质.生物化学杂志,1993,9(6):659～663
〔5〕BAILEY M, PETER B, KAISA P. Interalbortory testing of methods for assay of xylanase activity. J Biotech,1992,23:257～270
〔6〕朱静,严自正.微生物产生的木聚糖酶的功能和应用,生物工程学报,1996,12(4):375～378
〔7〕苏拔贤.生物化学制备技术.北京:科学出版社,1986,1.30-36

菌体自溶法/机械破碎法/超声波破碎法