神马品牌网水槽下面有冷凝水珠:急求破壁缓冲液！！！
来源：百度文库 编辑：神马品牌网 时间：2024/05/05 22:07:50
那位高手做过酵母细胞的破碎啊？
我要提酵母的线粒体，但一直找不到合适的破壁缓冲液。
帮帮忙啊！！！
我找不到合适的方法，于是就找了个具有普遍性的：尿素裂解液（尿素8mol/L, NaCl 0.5mol/L,Tris 20mmol/L, EDTA 20mmol/L, 2%SDS, PH值8.0），就是y2308 提到的，但是效果好像不是太好啊
我要提酵母的线粒体，但一直找不到合适的破壁缓冲液。
帮帮忙啊！！！
我找不到合适的方法，于是就找了个具有普遍性的：尿素裂解液（尿素8mol/L, NaCl 0.5mol/L,Tris 20mmol/L, EDTA 20mmol/L, 2%SDS, PH值8.0），就是y2308 提到的，但是效果好像不是太好啊
乳糖酶制备
采用甲苯破壁方法 制备粗酶液，取4.0ml发酵液，7000r/min离心5min，倾去上清液，向沉淀加入0.1mol/L KH2PO4缓冲液 （pH7.3，含0.15mmol/L MnCl2）至4.0ml，加入40μl甲苯，混匀2min，于40℃，150r/min摇床振荡破壁〔2〕即得本试验用粗乳糖酶。
http://www.wanfangdata.com.cn/qikan/periodical.Articles/ywswjs/ywsw2000/0003/000307.htm
试剂1. LB 液体培养基
胰蛋白胨10g/L,酵母浸膏5g/L，NaCl 10g/L,用NaOH调节至pH7.5，高压灭菌。
2. TEG缓冲液
称取0.3g Tris加入0.1mol/L HCl溶液14.6ml，先配制成pH8.0 Tris-HCl缓冲液100ml，再加入0.37g EDTA－Na2·2H2O和0.99g葡萄糖，临用前加入400mg溶菌酶。
http://www.etc.sjtu.edu.cn/xdshsy/syjc/jssy/syjc4/sy21.htm
http://www.bioon.com/experiment/mb1/80878.shtml
http://www.ebiotrade.com/newsf/2006-4/2006417171836.htm
磷酸盐试过了吗？